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开胃进食汤对实验性胃溃疡大鼠黏膜愈合和EGF表达的影响

作者:时间:2011-02-11 11:12:30 来源:www.ksfbw.com 阅读次数:891次 ]

【摘要】　　目的：通过开胃进食汤对胃黏膜组织的EGF表达的影响,探讨开胃进食汤对实验性胃溃疡大鼠胃黏膜的保护作用及其作用机制。方法：采用冰醋酸注射至大鼠浆膜下形成胃溃疡模型,随机分成生理盐水(B) 组,雷尼替丁(C)，组开胃进食汤(D) 组，设立正常对照(A) 组，用游标卡尺测量溃疡指数(UI),用免疫组化法检测胃黏膜组织EGF的表达。结果：C、D组与B组比较、D组与C组比较,UI、EGF表达均有显著性差异( P< 0. 05 或0. 01) ;且 C、D组溃疡边缘组织EGF阳性细胞表达较A、B 组逐渐增多(P< 0. 01)。结论：开胃进食汤具有促进EGF分泌、保护胃黏膜上皮细胞,加速上皮细胞增殖、分化、迁移,组织修复而加速溃疡愈合、提高溃疡愈合质量,改善溃疡预后。

【关键词】开胃进食汤;表皮生长因子;胃溃疡论文发表程序

　　［ABSTRACT］ Objective: To explore the influences of appetite promotion decoction on the mucosal healing and EGF expression in gastric ulcer model of mice, and its mechanism. Methods: Gastric ulcer model of mice were induced by subserosal injection of glacial acetic acid and then randomly divided into normal saline group (B), ranitidine group (C), appetite promotion decoction group (D), and normal control group (A). Ulcer index was measured with vernier caliper, and EGF expression in the mucosa tissue was eva luated by immunehistochemical method.Results: Significantly different size of UI and level of EGF repression were presented when group C and D were compared with group B, group D was compared with group C (P <0. 05 or 0.01). Besides, EGF expression level in the adjacent tissues of gastric ulcer lesion of group C and D gradually increased comparing with that of group A and B, showing significant differences (P<0.01). Conclusions: Appetite promotion decoction can promote EGF secretion, protect epithelial cells of gastric mucous, and facilitate the recovery of gastric ulcer by accelerating the proliferation, differentiation, migration, and tissue repair.

　　［KEY WORDS］ Appetite promotion decoction; Epidermal growth factor; Gastric ulcer

　　开胃进食汤源于《医宗金鉴》杂病心法要诀门类篇中,其方由党参、白术、茯苓、陈皮、半夏、炙甘草、丁香、木香、藿香、莲子肉、厚朴、砂仁、神曲、麦芽组成。临床研究证实其可以促进溃疡愈合,防止溃疡复发,但其机制仍不清楚。EGF 是一种具有抑制胃酸分泌,促进上皮增殖, 营养胃肠黏膜的内源性物质,在保护胃黏膜免受损伤因子破坏、维持胃肠黏膜完整性方面起着非常重要的作用,并通过刺激细胞的迁移和增殖以加速胃十二指肠溃疡愈合过程。本研究旨在探讨该药对实验性大鼠胃黏膜的愈合作用及其可能的机制。

　　1 材料与方法

　　1. 1 对象、试剂和仪器　

　　（1）选健康SD大鼠80只,雌雄各半,清洁级动物,体重180～220g,由西安交通大学医学院动物中心提供。室温下喂养,自由饮食饮水。（2）EGF免疫组化多克隆抗体和SABC 免疫织化学试剂盒均购自购自北京中杉金桥生物公司。图像分析采用MPIAS 多媒体彩色病理图纹分析系统。（3）药品：开胃进食汤（法半夏15g，陈皮15g，茯苓10g，白术12g，党参15g，砂仁12g，木香12g，麦芽30g，炙甘草10g，六神曲10g，丁香10g，木香10g，藿香10g）由海南医学院附属医院提供, 雷尼替丁由江西汇仁药业有限公司生产(国药准字H36021340) 。

　　1.2 动物模型制备、分组及给药方法

　　参照Takagi 法建立动物模型,80只SD大鼠随机分出20只为正常对照组(A组) ,另60只大鼠禁食24h 后,按3mg·kg- 1体重氯胺酮腹腔注射麻醉,剖腹暴露胃,用微型注射针头在胃前壁窦体交界处浆膜下注射100%冰醋酸0.03mL ,持续30s ,将胃送还腹腔,缝合皮肤。模型建立后5d随机分成3组,每组20只:生理盐水组(B 组) ,雷尼替丁组(C 组) ,开胃进食汤组(D 组) 。用药剂量按人与大鼠体表面积折算（大鼠日服药量=人日服药量×0.018）。中药以蒸馏水煎煮30min，提取2次，再合并煎液，并将所得药液用双层纱布过滤，水浴加热蒸发浓缩到200%，使每毫升药汗中含生药2g，置于100mL玻璃瓶内密封，贮于冰箱中备用；雷尼替丁胶囊由雷尼替丁胶囊与蒸馏水配成相应浓度的悬浊液备用。实验结束时A、D组各有1只死于灌胃;B组有1只死于胃穿孔;C组有1只死于腹腔感染。发表论文网站

　　1.3 胃组织标本制备　

　　喂养15d 后,禁食24h 处死,剪开大鼠腹腔,取出胃,展开胃组织,沿溃疡周围切下约0.5cm×0.5cm大小的胃壁组织放入4%多聚甲醛中,固定6h 后石蜡包埋切片。

1.4 观察指标及检测方法

　　溃疡指数(ulcer index , UI) 测定,采用游标卡尺(精确度0.02mm) 测量溃疡面的最大长径和垂直于最大长径的最大宽径,以二者的乘积作为溃疡指数。EGF测定采用免疫组织化学方法,严格按试剂盒说明步骤操作。每组每张切片随机选取5个视野作图像分析,即采用面积百分比、积分光密度、平均灰度来检测EGF的表达。细胞膜或细胞浆出现棕黄色颗粒为EGF阳性细胞。积分光密度越高,平均灰度越低,均说明阳性细胞数量越多。

　　1.5 统计学处理

　　试验数据用均数±标准差（±s）表示,各组数据之间的比较采用SPSS 11.5 分析软件,进行方差分析,检验水准 α=0.05。

　　2 结果

　　2.1 溃疡指数及EGF变化
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