五味子醇提物对小鼠老化模型脑神经递质的影响
【摘要】 目的 探讨五味子醇提物对小鼠脑老化模型脑乙酰胆碱酯酶(AChE)、单胺类神经递质的影响。方法 小鼠颈背部皮下连续40 d注射5% D半乳糖造脑老化模型,另设空白对照组,皮下注射生理盐水。从第11天分别灌服相应药物,1次/d。于最后1次给药后2 h,小鼠断头取脑,测脑匀浆AChE活性和单胺类神经递质含量。结果 与模型组相比,大剂量组可显著降低模型小鼠脑AchE活力,显著提高脑去甲肾上腺素(NA)、多巴胺(DA)水平,明显提高5羟色胺(5HT)水平。结论 五味子醇提部位可调节中枢神经递质的合成,有利于学习记忆,有抗脑老化作用。
【关键词】 五味子醇提物;D半乳糖;脑老化;神经递质
【Abstract】 Objective To observe the effect of Schisandra Chinensis Baill distilled by ethanol on acetylcholinesterase and neurotransmitter in aged mice model induced by Dgalactose. Methods 5% Dgalactose saline solution was injected into neck back subcutaneous tissue of mice to make the aged mice model for 40 days. From the 11th day, mice were filled with big, small dosage of Schisandra Chinensis Baill distilled by ethanol, Naokangling troche and the same dosage of saline solution everyday respectively. The blank control group was given hypertonic saline. Experiment was started on 2 h after giving Dgalactose and Schisandra Chinensis Baill distilled by ethanol in the last time. The activity of acetylcholinesterase (AchE) and the level of monoamine neurotransmitter in brain tissue were detected. Results Compared with model group, big dosage of Schisandra Chinensis Baill distilled by ethanol notably reduced the activity of AChE of mice, increased the level of nonadrenaline and dopamine, and increased the level of 5hydroxytryptamine (5HT) in the brain. Conclusions Schisandra Chinensis Baill distilled by ethanol could effectively adjust and improve the central neurotransmitter synthesis and be beneficial to learning and memory improvement and antibrain aging.
【Key words】 Schisandra Chinensis Baill distilled by ethanol; Dgalactose; Brainaging; Neurotransmitter
五味子性温味酸,归肺、肾、心经,具生津敛汗、涩精止泻、宁心安神之功效。五味子在调节中枢神经、兴奋免疫、延缓衰老等方面有较好的药理作用,五味子木脂素、五味子乙素、五味子酚有好的抗氧化作用,且五味子水提液有好的益智作用;我们前期研究表明,五味子多糖有抗衰老作用〔1〕。随着增龄,脑内神经递质及递质受体可呈现不同程度的减少,保护神经递质免受损伤因素的侵害,是发挥益智作用的重要途径之一。为进一步探讨五味子的药理特点,本研究旨在观察其醇提物对D半乳糖性小鼠脑老化模型的影响。
1 材料与方法教学论文发表
1.1 动物 昆明种小鼠,雌雄各半,体重18~21 g,河南医学动物实验中心提供〔豫医动管(证)字第0038号〕。
1.2 药品与试剂 干燥的五味子(河南省药材公司)制成粗颗粒,取1 000 g,分别以8倍量的95%、95%乙醇回流提取2次,合并两次醇提液,挥醇,浓缩至干,得浸膏298.2 g,每克浸膏相当于生药3.34 g;康脑灵,辽宁天龙药业有限公司生产,批号030804,规格0.363 g/片;三氯乙酸(分析纯),上海华彭实业有限公司,批号020104;D半乳糖,上海试剂二厂,批号030809;乙酰胆碱酯酶(AChE)测试盒,南京建成生物工程研究所,批号031211;正庚烷(分析纯),天津市化学试剂三厂,批号010424。
1.3 仪器 F4500型荧光分光光度计,日立公司生产;UV2000紫外可见分光光度计,尤尼柯(上海)仪器有限公司生产。
1.4 实验方法〔2,3〕 小鼠50只,雌雄各半,随机分为5组(n=10,雌雄分笼饲养),空白对照组各鼠每天颈背部皮下注射生理盐水25 ml/kg,其余4组每鼠每日颈背部皮下注射5%D半乳糖生理盐水液1.25 g/kg,造脑老化模型。每4天称计体重1次,调整注射剂量,连续给D半乳糖40 d。从第11天开始,分别灌服大、小剂量五味子醇提物混悬液(0.4、0.2 g/kg)、康脑灵片混悬液(0.7 g/kg)和脑老化模型组给予同体积生理盐水(20 ml/kg),每日1次。最后一次灌胃后2 h,小鼠断头取脑,将脑置液氮罐中冷冻备测AChE、去甲肾上腺素(NA)、多巴胺(DA)和5羟色胺(5HT)。体育论文发表
1.5 统计学分析 采用SPSS10.0统计软件,计量资料组间比较采用单因素方差分析,数据以x±s表示。
2 结 果
2.1 脑匀浆中AChE活力测定 与空白对照组小鼠脑匀浆AChE活力〔(0.277±0.039) U/mgprot〕比较,模型组〔(0.577±0.058) U/mgprot〕显著升高(P<0.01),说明造脑老化模型成功。与模型组相比,康脑灵组AchE活力〔(0.255±0.088) U/mgprot〕、大剂量五味子醇提物组AChE活力〔(0.264±0.042) U/mgprot〕可显著降低造模后小鼠(P<0.01),小剂量五味子提物组〔(0.540±0.050) U/mgprot〕无明显变化。表1 五味子醇提物对单胺类神经递质含量的影响(x±s,n=10,μg/g)
2.2 脑匀浆中NA、DA和5HT水平测定 与空白对照组比较,模型组小鼠脑匀浆中NA、DA、5HT含量显著降低(P<0.01),说明成功建立脑老化模型。与模型组相比,康脑灵和大剂量五味子醇提物可显著提高造模后小鼠脑匀浆DA、NA和5HT水平(P<0.01,P<0.05),小剂量五味子醇提物对NA、DA和5HT无影响,见表1。
3 讨 论
小鼠长期注射D半乳糖,可引起全身代谢紊乱,产生器官功能衰退,表现为脑细胞膜受损,脑内神经递质及递质
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