青蒿琥酯对H22小鼠肝癌的体内抑瘤作用

【摘要】  目的：探讨青蒿琥酯对H22小鼠肝癌的体内抑瘤作用。方法：取雌性KM小鼠40只，将H22小鼠肝癌细胞接种于小鼠右前肢腋皮下，随机分为模型对照组(Control)、环磷酰胺组(CTX)及青蒿琥酯(ASUN)30、90、150mg/kg低、中、高三个剂量组，共5组，每组8只。连续腹腔注射给药8天后，剥取瘤块和脾脏，称重，计算抑瘤率。结果：青蒿琥酯30、90、150mg/kg剂量组的抑瘤率分别为38.9%、31.1%和21.5%，抑瘤率随剂量增大而降低，其中青蒿琥酯30mg/kg剂量组与模型对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05);荷瘤小鼠脾质量随青蒿琥酯剂量增加而增大。结论：青蒿琥酯对H22小鼠肝癌具有体内抑瘤作用。

【关键词】  H22小鼠肝癌青蒿琥酯抑瘤作用

　AbstractObjective:To analyzed the inhibitory effect of Artesunate (ASUN) on hepatocarcinoma in H22 mice.　　Methods:Hepatocarcinoma model was established in 40 female KM mice by implanting H22 cell line.These mice were randomized into control group,cyclophosphamide(CTX) group and ASUN group.The ASUN groups were divided into 3 subgroups based on different doses of 30,90 and 150 mg/kg.Eight mice were in each group.Intervention methods were given for 8 days and inhibitory rate was calculated after treatment.Results:The inhibitory rates were 38.9%,31.1%,and 21.5% in 30,90,and 150 mg/kg ASUN groups.The inhibitory rate in the ASUN group of 30 mg/kg was significantly different to the control group (P<0.05).Spleen weight bearing carcinoma increased as the dose of ASUN increased.Conclusion:ASUN can inhibit the growth of hepatocarcinoma cell in H22 mice.

　　Key wordsH22 micehepatocarcinomaartesunateinhibitory effect

　　青蒿琥酯(Artesunate，ASUN)是通过化学方法对倍半萜内酯类青蒿素(Artemisinin)进行结构改造获得的水溶性衍生物，具有低毒、高效、速效的作用特点。临床上用于抢救和治疗脑型疟和恶性疟等疗效显著。多篇文献报道，青蒿琥酯具有体内、外抗肿瘤作用[1-3]。但腹腔注射青蒿琥酯给药对H22小鼠肝癌体内抗肿瘤试验报道尚少。为此，我们进行该方面的实验研究，现报道如下。

　　1实验材料药学论文发表

　　1.1药物注射用青蒿琥酯(ASUN)(60mg/支，批号011201，中国广西桂林第二制药厂);注射用环磷酰胺(CTX)(批号09010321，江苏恒瑞医药股份有限公司)。

　　1.2瘤株H22小鼠肝癌细胞株，购自中山大学实验动物中心细胞库。

　　1.3动物KM小鼠，SPF级，40只，雌性，18～22g，广东省医学实验动物中心，动物质量合格证：SCXK(粤)2008-0002。

　　2实验方法

　　2.1药物配制注射用青蒿琥酯(ASUN)，用5%NaHCO3溶解，再用生理盐水配制成1.5、4.5、7.5mg/ml低、中、高三个浓度，按0.2ml/10g给药，给药剂量分别为30、90、150mg/kg;取注射用环磷酰胺(CTX)，用生理盐水配制成2mg/ml，按0.1ml/10g给药，给药剂量为20mg/kg。所配溶液均于冰箱保存备用。

　　2.2取瘤种无菌操作，将H22小鼠肝癌细胞株腹腔接种小鼠，于第10天选择腹水饱满小鼠，用碘酒、75%乙醇局部消毒，无菌条件下抽取出腹水，用生理盐水按体积比1∶3稀释成瘤细胞悬液。

　　2.3接种瘤液给每只小鼠右前肢腋皮下准确接种瘤液0.2ml(细胞数约2×107)。

　　2.4分组给药接种24小时后，将小鼠随机分为青蒿琥酯低、中、高剂量组，CTX组和模型对照组，每组8只。青蒿琥酯按0.2ml/10g体重腹腔注射给药，CTX按0.1ml/10g体重腹腔注射给药，模型对照组腹腔注射生理盐水，1天1次。各组均连续注射8天。至实验结束，各组无小鼠死亡。

　　2.5称瘤重末次给药后24小时，颈椎脱臼处死小鼠，称体重，剥取瘤块和脾脏，称重，计算抑瘤率(%)。抑瘤率(%)=(模型对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)/模型对照组平均瘤重×100%。

　　2.6统计学方法实验数据均以(±s)表示，应用SPSS 11.0统计软件，用t检验进行统计学处理。
3实验结果

　　CTX组的抑瘤率为58.9%，对H22小鼠肝癌具有非常明显的体内抑制作用(P<0.01)。青蒿琥酯30、90、150mg/kg剂量组的抑瘤率分别为38.9%、31.1%和21.5%，抑瘤率随剂量增大而降低。其中青蒿琥酯低剂量组与模型对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。荷瘤小鼠脾质量随青蒿琥酯剂量增加而增加，见表1。表1青蒿琥酯对H22荷瘤小鼠体质量、脾脏及瘤体量的影响

　　4讨论

　　青蒿琥酯是我国首创的抗疟有效药物，临床上主要用于治疗疟疾，而用于治疗癌症报道较少。本文以荷瘤小鼠实体瘤重、抑瘤率为指标评价青蒿琥酯对H22小鼠肝癌的抑瘤作用。结果表明，青蒿琥酯低剂量(30mg/kg)具有明显的抑瘤作用，但随剂量增加而作用效果减弱，给药剂量与抑瘤率没有正相关关系。据有关文献报道，青蒿琥酯对H22小鼠肝癌的体内抑瘤剂量不稳定[3-5]，但最佳抑瘤剂量有待进一步的研究。实验发现，青蒿琥酯能使荷瘤小鼠的脾质量增加，且随剂量增加而增加，但是否反映机体免疫水平的提高[6]，有待进一步的研究。

【参考文献】教师论文发表网 
  　\[1\]Efferth T,Dunstan H,Sauerbrey A,et al.The anti-malarial artesunate is also active against cancer\[J\].Int J Oncol,2001,18(4)：767-773.

　　\[2\]王勤,吴理茂,李爱媛,等.青蒿琥酯抗肝癌作用的实验研究\[J\].中国中药杂志,2001,26(10)：707-708.

　　\[3\]盛庆寿,张华,农慧,等.青蒿琥酯对H22小鼠肿瘤VEGF表达的影响\[J\].中药药理与临床,2008,24(2)：8-10.

　　\[4\]肖柳英,林培英,张丹,等.青蒿琥酯对小鼠肝癌及S180实体瘤的抑制作用\[J\].实用癌症杂志,2001,16(3)：245-246.

　　\[5\]武晓,张玉萌.青蒿琥酯抗肿瘤作用的实验