帕金森病模型大鼠杏仁基底外侧核神经元电活动的研究
【摘要】 目的 观察单侧黑质纹状体通路毁损后杏仁基底外侧核(basolateral nucleus of amygdala, BLA)投射神经元电活动的变化。方法 应用6-羟多巴胺单侧毁损黑质致密部建立帕金森病(Parkinsons disease, PD)大鼠模型。采用玻璃微电极细胞外记录法，记录BLA投射神经元的电活动。结果 对照组和PD组大鼠BLA投射神经元的放电频率分别是(0.66±0.13)Hz(0.08-2.73 Hz, n=25)和(0.46±0.1)Hz(0.08-2.34 Hz, n=24)，PD组大鼠的放电频率较正常组降低，但无统计学差异(P>0.05)。对照组大鼠96%的BLA投射神经元呈现爆发式放电，4%为不规则放电；PD组大鼠90%的投射神经元显示爆发式放电，10%为不规则放电。PD组大鼠BLA投射神经元的放电形式与对照组相比无明显差异(P>0.05)。结论 帕金森病大鼠BLA投射神经元的放电频率和放电形式未发生改变。
【关键词】 帕金森病 6-羟多巴胺 杏仁基底外侧核 电生理学
ABSTRACT: Objective To investigate the changes in neuronal activity of projection neuron in the basolateral nucleus of amygdale (BLA) after the unilateral lesion of the nigrostriatal pathway. Methods The rat model of Parkinson's disease (PD) was established by 6-hydroxydopamine lesion of the substantia nigra pars compacta, and then the spontaneous discharge of projection neuron of the BLA was examined with extracelluar recording methods in control and PD rats. Results The results showed that the firing rates of projection neurons of the BLA were (0.66±0.13)Hz (0.08-2.73 Hz; n=25) and (0.46±0.1)Hz (0.08-2.34 Hz; n=24) in control and PD rats, respectively. The firing rates of the neurons in PD rats did not reach significant level compared to those of the control rats (P>0.05). In control rats, 96% of projection neurons of the BLA were discharged in bursts and 4% irregularly. In PD rats, 90% of projection neurons of the BLA had a bursting firing pattern and 10% irregularly. The distribution of firing patterns of the neurons in PD rats did not differ from that of the control rats (P>0.05). Conclusion The present data suggest that the degeneration of the nigrostriatal pathway did not cause changes in firing rates and firing pattern of projection neurons of the BLA in the rats.快速论文发表
KEY WORDS: Parkinsons disease; 6-hydroxydopamine; basolateral nucleus of amygdala; electrophysiology
帕金森病(Parkinsons disease, PD)是一种进行性的神经系统变性疾病，主要病理变化是黑质致密部(substantia nigra pars compacta, SNc)多巴胺能神经元的退行性变性，其临床症状主要为静止性震颤、肌强直和运动迟缓等。但是PD的病理改变不局限于黑质纹状体多巴胺能系统，研究发现在PD患者和动物也有边缘系统形态或(和)功能的变化。磁共振和尸检发现PD患者的杏仁核和海马的体积缩小，反映出这些结构中的神经元减少和路易氏体形成［1］。约有40%的PD病人有抑郁症的表现，并且抑郁表现可在运动系统症状之前出现［2］。此外，部分患者亦有焦虑和痴呆。基底外侧杏仁核(basolateral nucleus of amygdale, BLA)是边缘系统的一个重要结构，它由兴奋性的投射神经元和抑制性的中间神经元组成，BLA与情感性活动、学习与记忆等脑功能活动密切有关［3］。然而，BLA神经元的活动与帕金森病发病关系未见相关报道。因此，本研究以6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine, 6-OHDA)损毁SNc的PD模型大鼠为对象，采用电生理学方法，观察BLA投射神经元放电频率和放电形式的变化。
1 材料与方法
1.1 动物和药品
实验选用健康雄性Sprague-Dawley大鼠35只，体重250-350 g，由西安交通大学医学院实验动物中心提供。大鼠在标准环境中饲养，室温20-25 ℃，24 h昼夜循环光照，自由摄食饮水。预养1周后，随机分为2组：对照组19只和PD组16只。实验所用药品6-OHDA、阿朴吗啡以及地昔帕米均购自美国Sigma公司。
1.2 帕金森病大鼠模型的建立
采用6-OHDA化学性损毁SNc的多巴胺能神经元。6-OHDA溶于含0.1 g/L的抗坏血酸生理盐水中(2 μg/μL)，用前配制，避光保存。制作帕金森大鼠模型前30 min腹腔注射地西帕明(25 mg/kg)以保护去甲肾上腺素能神经元。然后经腹腔注射水合氯醛(300 mg/kg)麻醉，将大鼠头部固定于立体定位仪上。根据Paxinos-Watson大鼠脑定位图谱确定右侧SNc的位置：AP -5.0-5.3 mm，L 1.9-2.1 mm，D 7.2-7.4 mm［4］。将10 μL微量注射器与玻璃微电极相连，电极尖端直径约50 μm，分两个位点在SNc注射6-OHDA，每点2 μL(4 μg)，总量4 μL(8 μg)，注射完毕后留针5-10 min，缓慢退针。6-OHDA注射后1周，给大鼠颈部皮下注射阿朴吗啡(0.05 mg/kg)，10 min后诱发向健侧旋转每5 min大于20转者，表明PD模型成功，列为实验对象［5］。
1.3 电生理记录 职称论文怎么发表
电生理记录在SNc损毁后第3周进行。大鼠经腹腔注射乌拉坦(1.2 g/kg)麻醉，行气管插管和颈外静脉插管术，将其头部固定于脑立体定位仪上，依据Paxinos-Watson大鼠脑定位图谱确定BLA的位置，坐标为：AP -2.0-2.8 mm，L 4.8-5.0 mm，D 6.5-7.4 mm［4］。采用玻璃微电极细胞外记录法记录BLA神
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